蛋白质的测定方法及其优缺点？

1、凯氏定氮法

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

优点：可用于所有食品的蛋白质分析中；操作相对比较简单；实验费用较低；结果准确，是一种测定蛋白质的经典方法；用改进方法（微量凯氏定氮法）可测定样品中微量的蛋白质。　

缺点：凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不能把高价氮还原为氮盐的形式,所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。

蛋白质的检验方法？

蛋白质是构成人体各个器官的重要基本元素之一，对于人体来说非常重要。蛋白质的检验方法有多种，以下是其中两种常用的检验方法：

– 凯氏定氮法：准备4个50mL凯氏烧瓶并标号，向1、2号烧瓶中加入定量的蛋白质样品，另外两个烧瓶作为对照，在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物，再加入浓硫酸，将4个烧瓶放到消化架上进行消化，之后进行蒸馏。全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。

– 双缩脲法：首先利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线，将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合，并用只加入硫酸钠不含血清的试管作为对照，将两支试管加入等量的双缩脲试剂，充分混合后于37℃环境中放置10分钟。在540nm波长进行比色，以对照管调零，读取吸光度值，由标准曲线上直接查出蛋白质含量。

不同的蛋白质检验方法都有其适用范围和局限性，在选择检验方法时，需要根据具体的应用场景和需求来确定。如果需要进行蛋白质检验，建议咨询专业的检验机构或医生，以确保获得准确的检验结果。

含水量在蛋白质含量测定的用处

含水量在蛋白质含量测定的用处是减小误差，含水量将直接影响蛋白质含量的测定结果，测定误差随样品含水量的降低而减小。样品水分与建模样品水分含量相近时，样品水分差异引起的测定误差可以忽略不计。

蛋白质测定是指通过物理或化学的方法对蛋白质含量进行测定。蛋白质是构成人体细胞组织的重要成分，蛋白质测定是生物化学和分子生物学研究中最常用、最基本的分析方法之一。人体正常值一般是（60～80）g/L。蛋白质由多个氨基酸组成，也是人体的主要组成部分及食物的重要成分之一。

蛋白质含量测定

多采用凯氏定氮法，检测的是粗蛋白，原理是检测其中的氮含量，因为氮含量在真蛋白中大约是百分之6左右，所以，检测出氮含量后，乘以6、25就是粗蛋白含量了。 缺点是把非蛋白中的氮也算进去了，三聚氰胺是非蛋白氮，用凯氏定氮法检测时，也把它算进去了。

蛋白质含量的测定方法有哪些

蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。

1、微量凯氏定氮法：含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。

2、双缩脲法：双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。

3、folin―酚试剂法：这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。

4、考马斯亮兰法：1976年由bradford建立的考马斯亮兰法，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。

5、紫外吸收法：蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。